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樱田纯是一名不愿上学而长期不出家门的中学生，热衷于上网购物，喜欢在购买物品后的退货限期内退回物品。有一天收到一封自称是人工精灵荷里耶的来信，上…

樱田纯，一名不愿上学而长期宅在家里的中学生，热衷于上网购物，并喜欢在购买物品后的退货限期内退回物品。某天他收到一封奇怪的信，上面写着“上发条还是不上发条”的选项，纯在好奇心驱使下选择了“上发条”，之后房间里凭空出现了一只没有署名的神秘皮箱，里面装着一个非常美丽而且质感近似真人的少女人偶。使用木箱内的发条转动背部的开关后，人偶竟像有生命般活动起来，并向纯介绍自己：“我是真红，蔷薇少女的第五人偶。”这时，小丑布偶突然前来袭击，纯在在不明白怎么回事的情况下莫名其妙地成为了真红的媒介，结下了主仆关系。之后，另一对结下类似契约的人类和人偶出现在纯和真红面前，被称为Rozen Maiden（蔷薇少女） 的人偶们的战斗就此展开了……

时间从初中直接跳到了大学。虽然课还有去上，打工也有做，纯依然还是过着家里蹲般的生活。某日在打工的店收到退回来的一本教导如何制作人偶的神秘杂志，…

《薔薇少女 ～序曲～》作为TV动画的特別篇于2006年12月22、23日深夜播出，主角是水銀燈和真红，介绍两人从最初相遇到反目成仇的过程。共前、後兩篇。

真红将水银灯打败后，又回到了普通生活。 可是过没多久,又出现新的人偶——自称第七人偶的蔷薇水晶。 另一方面,随着金丝雀的来到，所有的蔷薇少女都到齐了，爱丽丝游戏也随之开启。 究竟蔷薇少女们会如何面对自己的命运……

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七个具有生命的人偶，七个美丽夺目的少女，她们已经超越人偶的存在，拥有不变的容颜，强大的力量。但却没有一个是父亲心里最完美的爱丽丝。痛苦的罗真消身匿迹，留下的蔷薇少女们。为了见到父亲，为了得到父亲的爱，她们坚信只要将姐妹体内的蔷薇圣母聚集到一起，便可以进化成为爱丽丝。罗真制造的七个蔷薇少女的传说，最终演变成一场她们自相残杀的战斗，但是这场战斗有个美丽的名字——Alice Game。就这样作为唯一的梦想，唯一活着的理由，她们不断觉醒又不断沉睡，与不同人缔结契约，在N之梦境中不断寻找姐妹战斗。

故事发生在黑手党出没的意大利。表面上，“社会福祉公社”是一间专门收容孤苦少女的福利院，但在背地里，他们却以杀手为目标训练这些肢体残缺的女孩。他们将少女们洗脑后进行肢体改造和实战训练，经过改造的女孩们，成为了不折不扣的杀人兵器。其中，要数海瑞塔（南里侑香 配音）、莉可（三桥加奈子 配音）、崔耶拉（仙台惠理 配音）、克拉耶斯（小清水亚美 配音）和安琪莉可（寺门仁美 配音）五人最为优秀。每个少女都配有一个年长男性作为辅佐官照顾其生活起居。虽然身份是杀手，但她们对自己的辅佐官都有着深厚的信任和感情。 少女们的敌人，是被称为“五共和国派”的恐怖组织，他们为了争取自由独立犯下了不择手段的罪行。少女们无法逃脱死亡的悲伤命运，残酷的战斗中，处处显现出这些无依无靠的“工具”们悲哀的身影。

这个世界存在着另一个平行的森林空间。女主每晚沉睡后都将化身为狼，出现在这个森林空间里。想不到她的同班同学林旸，竟然也出现在这里，并且是一只幼羚羊。女主角一直在【这块肉是我的】以及【我要保护林旸同学】之间反复弹跳着，纠结和其他食肉动物展开了激烈的夺食大战。